دوره 10، شماره 4 - ( 12-1402 )                   جلد 10 شماره 4 صفحات 40-22 | برگشت به فهرست نسخه ها


XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Ghandchi H, Ramezani R, Moosavinejad Z. Comparative study of several laboratory methods for isolating exosomes from bovine milk. nbr 2024; 10 (4) : 2
URL: http://nbr.khu.ac.ir/article-1-3624-fa.html
قندچی حانیه، رمضانی ریحانه، موسوی نژاد سیده زهرا. بررسی مقایسه‌ای چند روش آزمایشگاهی برای جداسازی اگزوزوم‌های شیر گاو. یافته‌ های نوین در علوم زیستی. 1402; 10 (4) :22-40

URL: http://nbr.khu.ac.ir/article-1-3624-fa.html


دانشگاه الزهرا ، re.ramezani@alzahra.ac.ir
چکیده:   (989 مشاهده)
امروزه اگزوزوم­های شیر به جهت دردسترس بودن و کارایی بسیار در محصولات آرایشی- بهداشتی و همچنین به عنوان نانوحامل­های دارویی، بسیار مورد توجه محققین قرار گرفته است. از آنجایی که یافتن روشی ساده و کارآمد برای جداسازی این وزیکول­ها بسیار با­اهمیت است، در این پژوهش به برخی روش­های جداسازی اگزوزوم از شیر گاو مانند اولتراسانتریفیوژ، جداسازی با استفاده از پلیمر PEG و چند کیت تجاری داخلی پرداخته و مشخصه­یابی اگزوزوم­ها با استفاده از DLS و میکروسکوپ الکترونی انجام شده است.
در روش اولتراسانتریفیوژ، به عنوان رایج­ترین روش جداسازی اگزوزوم، تعداد ذرات مشاهده­شده در تصاویر میکروسکوپ الکترونی بسیار پایین ±۲ پارتیکل در هر تصویر با بزرگنمایی تقریبی x ۶۰۰۰۰) برآورد شد، درحالی که در تصاویر میکروسکوپی کیت اگزوسان، تعداد ذرات زیادی (۱۵۰±۳۰پارتیکل در هر تصویر با بزرگنمایی تقریبی x ۳۰۰۰۰۰) قابل مشاهده بود. در جداسازی با استفاده از PEG، میانگین قطر ذرات با تکنیک DLS، ۲۶۳ نانومتر و بیشتر از روش­های اولتراسانتریفیوژ، کیت اگزوسیب و کیت آنااگزو که قطر ذرات به ترتیب ۱۷۶، ۱۴۲ و ۱۲۳ نانومتر بود، مشاهده گردید. میانگین قطر ذرات در تصاویر میکروسکوپی کیت اگزوسان، ۱۰±۷۰-۳۰ نانومتر بود که نتایج DLS هم کوچک­بودن سایز ذرات جداسازی­شده را تأیید کرد. با توجه به تعداد زیاد ذرات ریز (nm ۳۰ ) در نتایج میکروسکوپی کیت اگزوسان، این احتمال می­رود که چنین ذراتی به وفور در شیر وجود دارند و ممکن است روش­های دیگر قادر به جداسازی این ذرات ریز نبوده­اند. در نهایت هر چند تمامی روش­های مطالعه شده، قابلیت جداسازی اگزوزوم از شیر را داشتند ولی برای مقایسه دقیق­تر و معرفی یک روش استاندارد برای جداسازی اگزوزوم از شیر گاو، لازم است مطالعات گسترده ­­تری صورت پذیرد.
 
شماره‌ی مقاله: 2
متن کامل [PDF 1205 kb]   (481 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1402/2/20 | ویرایش نهایی: 1403/4/24 | پذیرش: 1402/7/22 | انتشار: 1402/12/23 | انتشار الکترونیک: 1402/12/23

فهرست منابع
1. Adriano, B., Cotto, N. M., Chauhan, N., Jaggi, M., Chauhan, S. C., & Yallapu, M. M. 2021. Milk exosomes: Nature's abundant nanoplatform for theranostic applications. Bioactive Materials 6: 2479-2490. [DOI:10.1016/j.bioactmat.2021.01.009]
2. Bae, I. S., & Kim, S. H. 2021. Milk Exosome-Derived MicroRNA-2478 Suppresses Melanogenesis through the Akt-GSK3β Pathway. Cells 10. [DOI:10.3390/cells10112848]
3. Benmoussa, A., Michel, S., Gilbert, C., & Provost, P. 2020. Isolating Multiple Extracellular Vesicles Subsets, Including Exosomes and Membrane Vesicles, from Bovine Milk Using Sodium Citrate and Differential Ultracentrifugation. Bio Protoc 10: e3636. [DOI:10.21769/BioProtoc.3636]
4. Caby, M.-P., Lankar, D., Vincendeau-Scherrer, C., Raposo, G., & Bonnerot, C. 2005. Exosomal-like vesicles are present in human blood plasma. International Immunology 17: 879-887. [DOI:10.1093/intimm/dxh267]
5. Chen, H., Wang, L., Zeng, X., Schwarz, H., Nanda, H. S., Peng, X., & Zhou, Y. 2021. Exosomes, a New Star for Targeted Delivery. Front Cell Dev Biol 9: 751079. [DOI:10.3389/fcell.2021.751079]
6. Chopra, N., Dutt Arya, B., Jain, N., Yadav, P., Wajid, S., Singh, S. P., & Choudhury, S. 2019. Biophysical Characterization and Drug Delivery Potential of Exosomes from Human Wharton's Jelly-Derived Mesenchymal Stem Cells. ACS Omega 4: 13143-13152. [DOI:10.1021/acsomega.9b01180]
7. Coughlan, C., Bruce, K. D., Burgy, O., Boyd, T. D., Michel, C. R., Garcia-Perez, J. E., . . . Potter, H. 2020. Exosome Isolation by Ultracentrifugation and Precipitation and Techniques for Downstream Analyses. Current protocols in cell biology 88: e110-e110. [DOI:10.1002/cpcb.110]
8. Dash, M., Palaniyandi, K., Ramalingam, S., Sahabudeen, S., & Raja, N. S. 2021. Exosomes isolated from two different cell lines using three different isolation techniques show variation in physical and molecular characteristics. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes 1863: 183490. [DOI:10.1016/j.bbamem.2020.183490]
9. Doyle, L. M., & Wang, M. Z. 2019. Overview of Extracellular Vesicles, Their Origin, Composition, Purpose, and Methods for Exosome Isolation and Analysis. Cells 8: 727. [DOI:10.3390/cells8070727]
10. Filipe, V., Hawe, A., & Jiskoot, W. 2010. Critical evaluation of Nanoparticle Tracking Analysis (NTA) by NanoSight for the measurement of nanoparticles and protein aggregates. Pharm Res 27: 796-810. [DOI:10.1007/s11095-010-0073-2]
11. Helwa, I., Cai, J., Drewry, M. D., Zimmerman, A., Dinkins, M. B., Khaled, M. L., . . . Liu, Y. 2017. A Comparative Study of Serum Exosome Isolation Using Differential Ultracentrifugation and Three Commercial Reagents. PLoS One 12: e0170628. [DOI:10.1371/journal.pone.0170628]
12. Jung, M. K., & Mun, J. Y. 2018. Sample Preparation and Imaging of Exosomes by Transmission Electron Microscopy. Journal of visualized experiments : JoVE: 56482. [DOI:10.3791/56482]
13. Kandimalla, R., Aqil, F., Tyagi, N., & Gupta, R. 2021. Milk exosomes: A biogenic nanocarrier for small molecules and macromolecules to combat cancer. 85: e13349. [DOI:10.1111/aji.13349]
14. Konoshenko, M. Y., Lekchnov, E. A., Vlassov, A. V., & Laktionov, P. P. 2018. Isolation of Extracellular Vesicles: General Methodologies and Latest Trends. BioMed research international 2018: 8545347. [DOI:10.1155/2018/8545347]
15. Kotmakçı, M., & Erel Akbaba, G. (2017). Exosome Isolation: Is There an Optimal Method with Regard to Diagnosis or Treatment? In (pp. 163-182). [DOI:10.5772/intechopen.69407]
16. Lässer, C., Seyed Alikhani, V., Ekström, K., Eldh, M., Torregrosa Paredes, P., Bossios, A., . . . Valadi, H. 2011. Human saliva, plasma and breast milk exosomes contain RNA: uptake by macrophages. Journal of Translational Medicine 9: 9. [DOI:10.1186/1479-5876-9-9]
17. Li, W.-J., Chen, H., Tong, M.-L., Niu, J.-J., Zhu, X.-Z., & Lin, L.-R. 2022. Comparison of the yield and purity of plasma exosomes extracted by ultracentrifugation, precipitation, and membrane-based approaches. Open Chemistry 20: 182-191. [DOI:10.1515/chem-2022-0139]
18. Melnik, B. C., Stremmel, W., Weiskirchen, R., John, S. M., & Schmitz, G. 2021. Exosome-Derived MicroRNAs of Human Milk and Their Effects on Infant Health and Development. Biomolecules 11. [DOI:10.3390/biom11060851]
19. Mohd Younus Bhat, T. A. D. a. L. R. S. ( 2016). Casein Proteins: Structural and Functional Aspects, Milk Proteins - From Structure to Biological Properties and Health Aspects,.
20. Munagala, R., Aqil, F., Jeyabalan, J., & Gupta, R. C. 2016. Bovine milk-derived exosomes for drug delivery. Cancer letters 371: 48-61. [DOI:10.1016/j.canlet.2015.10.020]
21. Pisitkun, T., Shen, R.-F., & Knepper, M. A. 2004. Identification and proteomic profiling of exosomes in human urine. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 101: 13368-13373. [DOI:10.1073/pnas.0403453101]
22. Sánchez, C., Franco, L., Regal, P., Lamas, A., Cepeda, A., & Fente, C. 2021. Breast Milk: A Source of Functional Compounds with Potential Application in Nutrition and Therapy. Nutrients 13. [DOI:10.3390/nu13031026]
23. Tang, Y.-T., Huang, Y.-Y., Zheng, L., Qin, S.-H., Xu, X.-P., An, T.-X., . . . Wang, Q. 2017. Comparison of isolation methods of exosomes and exosomal RNA from cell culture medium and serum. International journal of molecular medicine 40: 834-844. [DOI:10.3892/ijmm.2017.3080]
24. Vaswani, K., Koh, Y. Q., Almughlliq, F. B., Peiris, H. N., & Mitchell, M. D. 2017. A method for the isolation and enrichment of purified bovine milk exosomes. Reproductive Biology 17: 341-348. [DOI:10.1016/j.repbio.2017.09.007]
25. Vaswani, K., Mitchell, M. D., Holland, O. J., Qin Koh, Y., Hill, R. J., Harb, T., . . . Peiris, H. 2019. A Method for the Isolation of Exosomes from Human and Bovine Milk. Journal of Nutrition and Metabolism 2019: 5764740. [DOI:10.1155/2019/5764740]
26. Wijenayake, S., Eisha, S., Tawhidi, Z., Pitino, M. A., Steele, M. A., Fleming, A. S., & McGowan, P. O. 2021. Comparison of methods for pre-processing, exosome isolation, and RNA extraction in unpasteurized bovine and human milk. PLoS One 16: e0257633. [DOI:10.1371/journal.pone.0257633]
27. Yakubovich, E. I., Polischouk, A. G., & Evtushenko, V. I. 2022. Principles and Problems of Exosome Isolation from Biological Fluids. Biochem (Mosc) Suppl Ser A Membr Cell Biol 16: 115-126. [DOI:10.1134/S1990747822030096]
28. Yamada, T., Inoshima, Y., Matsuda, T., & Ishiguro, N. 2012. Comparison of methods for isolating exosomes from bovine milk. J Vet Med Sci 74: 1523-1525. [DOI:10.1292/jvms.12-0032]
29. Yamauchi, M., Shimizu, K., Rahman, M., Ishikawa, H., Takase, H., Ugawa, S., . . . Inoshima, Y. 2019. Efficient method for isolation of exosomes from raw bovine milk. Drug Development and Industrial Pharmacy 45: 359-364. [DOI:10.1080/03639045.2018.1539743]
30. Yang, X.-X., Sun, C., Wang, L., & Guo, X.-L. 2019. New insight into isolation, identification techniques and medical applications of exosomes. Journal of Controlled Release 308: 119-129. [DOI:10.1016/j.jconrel.2019.07.021]
31. Zhang, Q., Xiao, Q., Yin, H., Xia, C., Pu, Y., He, Z., . . . Wang, Y. 2020. Milk-exosome based pH/light sensitive drug system to enhance anticancer activity against oral squamous cell carcinoma. RSC Adv 10: 28314-28323. [DOI:10.1039/D0RA05630H]
32. Zhang, Y., Bi, J., Huang, J., Tang, Y., Du, S., & Li, P. 2020. Exosome: A Review of Its Classification, Isolation Techniques, Storage, Diagnostic and Targeted Therapy Applications. Int J Nanomedicine 15: 6917-6934. [DOI:10.2147/IJN.S264498]
33. Zhou, M., Weber, S. R., Zhao, Y., Chen, H., & Sundstrom, J. M. (2020). Chapter 2 - Methods for exosome isolation and characterization. In L. Edelstein, J. Smythies, P. Quesenberry, & D. Noble (Eds.), Exosomes (pp. 23-38): Academic Press. [DOI:10.1016/B978-0-12-816053-4.00002-X]

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA

ارسال پیام به نویسنده مسئول


بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

Creative Commons Licence
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.




کلیه حقوق این وب سایت متعلق به یافته های نوین در علوم زیستی است.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2015 All Rights Reserved | Nova Biologica Reperta

Designed & Developed by : Yektaweb